執(zhí)業(yè)藥師考試輔導(dǎo):藥物分析之柱色譜法
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1.吸附柱色譜
色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果。除另有規(guī)定外，通常多采用直徑為0.07～0.15mm的顆粒。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各品種項下的規(guī)定。
(1)吸附劑的填裝
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將吸附劑一次加入色譜管，振動管壁使其均勻下沉，然后沿管壁緩緩加入洗脫劑;或在色譜管下端出口處聯(lián)接活塞，加入適量的洗脫劑，旋開活塞使洗脫劑緩緩滴出，然后自管頂緩緩加入吸附劑，使其均勻地潤濕下沉，在管內(nèi)形成松緊適度的吸附層。操作過程中應(yīng)保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。
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將吸附劑與洗脫劑混合，攪拌除去空氣泡，徐徐傾入色譜管中，然后加入洗脫劑將附著管壁的吸附劑洗下，使色譜柱面平整。
俟填裝吸附劑所用洗脫劑從色譜柱自然流下，液面和柱表面相平時，即加供試品溶液。
(2)供試品的加入
除另有規(guī)定外，將供試品溶于開始洗脫時使用的洗脫劑中，再沿色譜管壁緩緩加入，注意勿使吸附劑翻起?；?qū)⒐┰嚻啡苡谶m當(dāng)?shù)娜軇┲校c少量吸附劑混勻，再使溶劑揮發(fā)去盡使呈松散狀，加在已制備好的色譜柱上面。如供試品在常用溶劑中不溶，可將供試品與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入。
(3)洗脫
除另有規(guī)定外，通常按洗脫劑洗脫能力大小遞增變換洗脫劑的品種和比例，分別分部收集流出液，至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時，再改變洗脫劑的品種和比例。操作過程中應(yīng)保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。
2.分配柱色譜
方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前，先將載體和固定液混合，然后分次移入色譜管中并用帶有平面的玻棒壓緊;供試品可溶于固定液，混以少量載體，加在預(yù)制好的色譜柱上端。
洗脫劑需先加固定液混合使之飽和，以避免洗脫過程中兩相分配的改變。
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