2013檢驗(yàn)主管技師考試臨床化學(xué)：免疫化學(xué)法測(cè)定個(gè)別蛋白質(zhì)

    點(diǎn)擊進(jìn)入：2013年檢驗(yàn)技師考試時(shí)間：5月18、19、25、26

　　散射比濁法和透射比濁法由于測(cè)定方法簡(jiǎn)便、快速而被廣泛使用。許多試劑盒供應(yīng)抗血清及標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)，即可建立此測(cè)定法。此技術(shù)可以測(cè)定抗原-抗體復(fù)合物(沉淀顆粒)形成的量(終點(diǎn)法)，亦可采用測(cè)定復(fù)合物形成的速率(動(dòng)力學(xué)方法，即通過(guò)散射濁度計(jì)測(cè)定抗原-抗體混合反應(yīng)復(fù)合物顆粒形成的時(shí)間，即反應(yīng)速率。一定條件下，反應(yīng)速率與反應(yīng)體系中抗原的含量直線相關(guān)，可以通過(guò)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線而計(jì)算)。

　　現(xiàn)已有設(shè)計(jì)完善的帶微電腦進(jìn)行數(shù)據(jù)處理的散射濁度計(jì)和透射濁度計(jì)，以免疫化學(xué)系統(tǒng)(immuno-chemicalsystem,ICs )可供應(yīng)。免疫擴(kuò)散法不需昂貴設(shè)備，放射免疫法則需要液體閃爍計(jì)數(shù)器及應(yīng)用放射性同位素。

　　現(xiàn)將幾種常用的免疫化學(xué)測(cè)定法的特點(diǎn)列表總結(jié)比較于表2-9、10中。

　　表2-9　電泳與免疫化學(xué)檢測(cè)血清蛋白列表比較

　　表2-10　幾種免疫化學(xué)測(cè)定方法的比較

　　關(guān)于免疫化學(xué)測(cè)定方法中的標(biāo)準(zhǔn)品和方法的標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題：含有準(zhǔn)確含量的純抗原蛋白不易買(mǎi)到。制備的抗血清由于其來(lái)源不同，其特異性和靈敏度效價(jià)有很大差異，一個(gè)純蛋白制劑來(lái)制備高特異性的抗血清亦非輕易之舉。因此抗血清的制備和方法的標(biāo)準(zhǔn)化是方法推廣和使用的關(guān)鍵。據(jù)美國(guó)病理學(xué)會(huì)的研究報(bào)告，測(cè) α1AT用同一標(biāo)本，使用5種不同的方法在510個(gè)實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的結(jié)果從1.6-2.34g/L。同一研究中C3補(bǔ)體的測(cè)定采用了8種不同方法，測(cè)定結(jié)果為 149-282mg/L。

　　世界衛(wèi)生組織目前提供以下參考標(biāo)準(zhǔn)品：IgG 、IgA、IgM、IgD、IgE、αFP、CEA、Alb、C3、CER及TRP。使用國(guó)際單位(IU)，沒(méi)有使用絕對(duì)的質(zhì)量單位。美國(guó)疾病控制中心(CDC)供應(yīng)的國(guó)家參考標(biāo)準(zhǔn)品人血清蛋白質(zhì)含13種蛋白質(zhì)，亦使用WHO的國(guó)際單位標(biāo)明含量。

　　由于不易獲得穩(wěn)定的抗血清和標(biāo)準(zhǔn)化的參考蛋白質(zhì)，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室還不得不根據(jù)自己的條件建立自己的正常參考值。

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