2015臨床執(zhí)業(yè)藥師考試：細(xì)菌分解代謝產(chǎn)物檢測

　　細(xì)菌的分解代謝產(chǎn)物因各種細(xì)菌具備的酶不完全相同，而有所差異。各代謝產(chǎn)物可通過生化試驗的方法檢測，通常稱為細(xì)菌的生化的反應(yīng)。

　　1.糖代謝測定

　　(1)糖發(fā)酵試驗：細(xì)菌對各種糖的分解能力及代謝產(chǎn)物不同，可借以鑒別細(xì)菌。一般非致病菌能發(fā)酵多種單糖，如大腸桿菌能分解葡萄糖有乳糖，產(chǎn)生甲酸等產(chǎn)物，并有甲酸解氫酶，可將其分解為CO2和H2，故生化反應(yīng)結(jié)果為產(chǎn)酸產(chǎn)氣，以“?”表示。傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸，但無解氫酶。故生化結(jié)果為產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，以“+”表示。傷寒桿菌及一般致病菌大都不能分解乳糖，以“-”表示。

　　(2)VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖?，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化(在堿性溶液中)生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，VP陰性。

　　(3)甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH>5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH<5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗陽性。

　　(4)枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍(lán)(BTB)由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán)，此為枸櫞酸鹽利用試驗陽性。

　　2.蛋白質(zhì)代謝測定

　　(1)吲哚試驗：含有色氨酸酶的細(xì)菌(如大腸桿菌、變形桿菌等)可分解色氨酸生成吲哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，與吲哚結(jié)合，形成玫瑰吲哚，呈紅色，稱吲哚試驗陽性。

　　(2)硫化氫試驗：變形桿菌、乙型副傷寒桿菌等能分解含硫氨基酸如胱氨酸、甲硫氨酸等，生成硫化氫。在有醋酸鉛或硫酸亞鐵存在時，則生成黑色硫化鉛或硫化亞鐵，可借以鑒別細(xì)菌。

　　3.尿素分解試驗

　　變形桿菌具有尿素酶，可分解尿素產(chǎn)生氨，培養(yǎng)基呈堿性，以酚紅為指示劑檢測呈紅色，由此區(qū)別于沙門氏菌。

　　吲哚(I)、甲基紅(M)、VP(V)、枸櫞酸鹽利用(C)四種試驗，常用于鑒定腸道桿菌，合稱之為IMViC試驗。大腸桿菌呈“++――”，產(chǎn)氣桿菌為“――++”。

　　氣相、液相色譜法通過對細(xì)菌分解代謝產(chǎn)物中揮發(fā)性或不揮發(fā)性有機(jī)酸和醇類的檢測，可準(zhǔn)確、快速地確定細(xì)菌的種類，是目前進(jìn)行細(xì)菌生化鑒定的高新技術(shù)。

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