臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試生物化學(xué)考試輔導(dǎo):核酸的結(jié)構(gòu)和功能
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知識點二:核酸的結(jié)構(gòu)和功能
1.核酸的基本組成單位―核苷酸(非常重要)
核酸包括脫氧核糖核酸(dna)和核糖核酸(rna)兩大類。dna是遺傳信息的貯存和攜帶者,rna主要參與遺傳信息表達(dá)的各過程。
1.1.核苷酸分子組成
核酸也稱為多核苷酸,是由數(shù)十個以至數(shù)千萬計的核苷酸構(gòu)成的生物大分子。核苷酸分子由堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸三種分子連接而成。堿基與糖通過糖苷鍵連成核苷,核苷與磷酸以酯鍵結(jié)合成核苷酸。參與核苷酸組成的主要堿基有5種,屬于嘌呤類化合物的堿基有腺嘌呤a和鳥嘌呤g。屬于嘧啶類化合物的堿基有胞嘧啶c、尿嘧啶u和胸腺嘧啶t。
1.2.核酸(dna和rna)
幾個或十幾個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接而成的分子稱寡核苷酸,由更多的核苷酸連接而成的聚合物就是多聚核苷酸(方向:5?→3?)。dna分子中出現(xiàn)的堿基有a、t、c和g,糖為脫氧核糖。rna分子中所含的堿基是a、u、c和g,糖為核糖。dna分子由2條脫氧核糖核苷酸鏈組成,rna分子由1條核糖核苷酸鏈組成。
2.dna的結(jié)構(gòu)與功能
2.1.dna堿基組成規(guī)律
?、?dna分子中a的摩爾數(shù)與t的摩爾數(shù)相等,c與g的相等。
?、?dna堿基組成具有種屬特異性。
?、?dna堿基組成無組織或器官特異性。同一個體不同器官或組織的dna具有相同的堿基組成。
?、苌矬w內(nèi)堿基組成不受年齡、生長狀況、環(huán)境等條件的影響。
2.2.dna的一級結(jié)構(gòu)
dna的一級結(jié)構(gòu)是指核酸分子中核苷酸的排列順序及其連接方式。在任何dna分子中的脫氧核糖-磷酸,或在任何rna分子中的核糖-磷酸連成的長鏈?zhǔn)窍嗤?,而不同的是連在糖環(huán)c-1’位上的堿基排列順序。所以核酸的一級結(jié)構(gòu)也稱為堿基序列。
2.3.dna雙螺旋結(jié)構(gòu)
雙螺旋是dna二級結(jié)構(gòu)形式,它的結(jié)構(gòu)要點如下:
?、?dna分子由兩條反向平行的脫氧多核苷酸鏈組成;兩鏈以脫氧核糖-磷酸作骨架的雙鏈組成,以右手螺旋的方式圍繞同一中心軸盤旋成雙螺旋結(jié)構(gòu)。螺旋直徑2nm,并形成交替出現(xiàn)的大溝和小溝。
?、?兩股單鏈的脫氧核糖-磷酸骨架位于螺旋外側(cè),戊糖相連的堿基平面垂直于螺旋軸而伸入螺旋之內(nèi)。每個堿基與對應(yīng)鏈上的堿基共處同一平面,并以氫鍵維持配對關(guān)系,a與t配對,c與g配對。螺旋旋轉(zhuǎn)一周為10對堿基。
?、?兩堿基之間的氫鍵是維持雙螺旋橫向穩(wěn)定的主要化學(xué)鍵??v向則以堿基平面之間的堿基堆積力(主要作用)維持穩(wěn)定。
?、? 每兩個相鄰堿基對平面之間的距離是0.34nm;螺旋每轉(zhuǎn)一周的螺距為3.4nm,每個旋距內(nèi)含10個堿基對。
?、?堿基可以在多核苷酸鏈中以任何排列順序存在。
2.4.dna的高級結(jié)構(gòu)
原核生物沒有細(xì)胞核,其dna分子在雙螺旋基礎(chǔ)上進(jìn)一步扭轉(zhuǎn)盤曲,形成超螺旋,使體積壓縮。超螺旋結(jié)構(gòu)就是dna的三級結(jié)構(gòu)。
真核生物的染色體中,dna的三級結(jié)構(gòu)是指dna與組蛋白結(jié)合構(gòu)成核小體進(jìn)而形成超螺旋結(jié)構(gòu)。
意義:①利于胞內(nèi)組裝②影響雙螺旋解鏈程序
2.5.dna的功能
dna的基本功能是以基因的形式荷載遺傳信息,并作為基因復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的模板。dna是生命遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ),也是個體生命活動的信息基礎(chǔ)。
3.dna變性及其應(yīng)用
3.1.dna變性和復(fù)性的概念
在極端的ph值(加酸或堿)和受熱條件下,dna分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,這就是dna的變性。變性后的dna在260nm的紫外光吸收增強(qiáng),稱為高色效應(yīng)。在dna變性中以dna的熱變性意義最大。dna的熱變性又稱dna的解鏈或融解作用。在dna熱變性過程中,使紫外吸收達(dá)到最大增值50%時的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度tm。tm與dna分子g+c量有關(guān)。
熱變性的dna溶液經(jīng)緩慢冷卻,兩條解鏈的互補單鏈重新締合,恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu),即退火。變性dna經(jīng)退火恢復(fù)原狀的過程稱變性dna的復(fù)性。伴隨復(fù)性,dna溶液紫外吸收減弱,稱減色效應(yīng)。
3.2.核酸雜交
復(fù)性是指核酸雙鏈分子中分開的兩股單鏈重新結(jié)合。復(fù)性可以發(fā)生在具有堿基配對的不同來源的核酸鏈之間,形成雜化雙鏈,這一過程稱為核酸雜交,生成的雙鏈稱為雜化雙鏈。核酸雜交技術(shù)(例:核酸探針)是目前研究核酸結(jié)構(gòu)、功能常用的手段之一。
4.rna結(jié)構(gòu)與功能
rna與dna不同,它通常以數(shù)十個至數(shù)千個核苷酸組成的單鏈形式存在,但也可以有局部的二級結(jié)構(gòu)或三級結(jié)構(gòu)。它比dna分子小,它的功能多樣,種類較多,主要有信使rna(mrna)、轉(zhuǎn)運rna(trna)、核糖體rna(rrna)三類。
4.1. 信使rna(mrna):
mrna為線狀單鏈結(jié)構(gòu)??勺鳛榈鞍踪|(zhì)合成的模板。
真核生物:①mrna在5’-端含倒裝的7-甲基三磷酸鳥苷(m7gppp),稱為帽子結(jié)構(gòu)(可避免核酸酶的降解)。②mrna的3’-末端有一段長短不一的多聚腺苷酸polya序列,由數(shù)十個至上百個腺苷酸連接而成。3’-末端的多聚腺苷酸結(jié)構(gòu)可增加轉(zhuǎn)錄活性,增加mrna穩(wěn)定性。③5’加 “帽”、3’加“尾”屬轉(zhuǎn)錄后加工過程。④分子中有修飾堿基并有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。
原核生物:①mrna往往是多順反子②無帽子結(jié)構(gòu)無多聚a尾巴③無修飾堿基。
分子中的每3個核苷酸為一組,決定肽鏈上一個氨基酸,稱為遺傳密碼。其特點:①三個相連核苷酸組成一個密碼子,編碼一個氨基酸,共有64個密碼子。②密碼子之間無核苷酸間隔。③一種氨基酸可有多種密碼子。④所有生物使用同一套密碼子。
4.2.轉(zhuǎn)運rna(trna):
70至90個核苷酸構(gòu)成。分子中含有稀有堿基,包括雙氧尿嘧啶、假尿嘧啶和甲基化的嘌呤。
?、賢rna的作用是攜帶相應(yīng)的氨基酸將其轉(zhuǎn)運到核蛋白體上以供蛋白質(zhì)合成。
②trna的二級結(jié)構(gòu)呈三葉草樣。
③trna的三級結(jié)構(gòu)呈倒l形。
4.3.核蛋白體rna(rrna):
細(xì)胞內(nèi)含量最多的rna,約占rna總量的80%以上。rrna與核糖體蛋白共同構(gòu)成核糖體。rrna由大亞基和小亞基組成。真核生物的核糖體小亞基由18srrna和30多種核糖體蛋白構(gòu)成,大亞基則由5s、5.8s及28s三種rrna與50種核糖體蛋白組成。當(dāng)大小亞基聚合時,可作為蛋白質(zhì)合成的場所。
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