檢驗主管技師考試知識點:單向擴散試驗
更新時間:2019-05-20 13:24:11
來源:環(huán)球網校
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摘要 臨床檢驗醫(yī)師的復習過程中,一些知識點、概念很相似卻完全不同,比如:潛伏期(incubation period)是指病原體侵入機體到最初出現癥狀和體征之間的這段時期;窗口期(window period)指的是病毒感染后病毒出現在血液中直到可以檢出足夠多的相應病毒標志物(抗原或抗體)前的時期。
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單向擴散試驗:瓊脂內混入抗體,待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散,如抗原和相應抗體結合,則形成沉淀環(huán)。
1、試管法:將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中,注入小試管內,上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散,在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環(huán)。
2、平板法:是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內,未凝固前傾注成平板,然后在上打孔,將抗原加入孔中,放37℃讓其自由擴散,24~48h后可見孔周圍出現沉淀環(huán),測定環(huán)的直徑或面積計算標本中待測抗原的濃度。有兩種計算方法:l)Mancini曲線:適用大分子抗原的和長時間擴散(>48h)的結果,沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關系c/d2=k.(其中c為抗原濃度d為沉淀環(huán)直徑k為常數)
3、單向擴散試驗檢測時的注意點:
(1)抗血清必須特異性強、效價高、親和力強,在良好條件下保存。
(2)每次測定都必須作標準曲線。
(3)每次測定時必須用質控血清作質控。
(4)注意雙環(huán)現象(出現了兩種抗原性相同成分)。
(5)應用單克隆抗體測量多態(tài)性抗原時,測定值偏低;用多克隆抗體測量單克隆病時,測定值偏高。
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