2013醫(yī)學(xué)檢驗輔導(dǎo):酶擴(kuò)大免疫測定技術(shù)
更新時間:2013-03-15 13:01:06
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摘要 酶擴(kuò)大免疫測定技術(shù)
酶擴(kuò)大免疫測定技術(shù)是最早取得實際應(yīng)用的均相酶免疫測定方法,是由美國Syva公司研究成功并定名的。此法主要檢測小分子抗原或半抗原,在藥物測定中取得較多應(yīng)用。酶擴(kuò)大免疫測定技術(shù)(enzyme-multipliedimmunoassaytechnique,EMIT)試劑盒的商標(biāo)取名為EMIT。
EMIT的基本原理是半抗原與酶結(jié)合成酶標(biāo)半抗原,保留半抗原和酶的活性。當(dāng)酶標(biāo)半抗原與抗體結(jié)合后,所標(biāo)的酶與抗體密切接觸,使酶的活性中心受影響而活性被抑制。EMIT試劑盒中的主要試劑為:①抗體,②酶標(biāo)半抗原,③酶的底物。檢測對象為標(biāo)本中的半抗原。當(dāng)試劑①、②與標(biāo)本混合后,標(biāo)本中的半抗原與酶標(biāo)的半抗原競爭性地與試劑中的抗體相結(jié)合。如標(biāo)本中的半抗原量少,與抗體結(jié)合的酶標(biāo)半抗原的比例增高,游離的具有酶活力的酶標(biāo)半抗原的量就減少。因此在反應(yīng)后酶活力大小一標(biāo)本中的半抗原呈一定的比例,從酶活力的測定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。
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