初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):膜載體的酶免疫測(cè)定
更新時(shí)間:2010-12-03 14:33:17
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初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):膜載體的酶免疫測(cè)定
膜載體的酶免疫測(cè)定
(1)斑點(diǎn)-ELISA:特點(diǎn):①以吸附蛋白質(zhì)能力很強(qiáng)的硝酸纖維素膜為固相載體,在膜上點(diǎn)加樣品抗原;②底物經(jīng)酶反應(yīng)后形成有色沉淀,使固相膜染色。原理:同ELISA相似。
(2)免疫印跡法(IBT):亦稱酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印斑法(EITB),亦被稱為Western blot。免疫印跡法分三個(gè)階段進(jìn)行。第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。第二階段為電轉(zhuǎn)移。第三階段為酶免疫定位。常用的HRP底物為3,3’-二氨基聯(lián)苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈藍(lán)紫色)。
(3)斑點(diǎn)免疫滲濾試驗(yàn):以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔濾膜的可濾過性,使抗原抗體反應(yīng)和洗滌在一特殊的滲濾裝置上,以液體滲濾過膜的方式迅速完成。
(4)斑點(diǎn)免疫層析試驗(yàn):以硝酸纖維素為載體,利用微孔濾膜的毛細(xì)血管作用,滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,猶如層析一般。
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