2017年臨床助理醫(yī)師考試復(fù)習(xí)資料之pH對反應(yīng)速度的影響
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pH對反應(yīng)速度的影響
酶反應(yīng)介質(zhì)的pH可影響酶分子,特別是活性中心上必需基團(tuán)的解離程度和催化基團(tuán)中質(zhì)子供體或質(zhì)子受體所需的離子化狀態(tài),也可影響底物和輔酶的解離程度,從而影響酶與底物的結(jié)合。只有在特定的pH條件下,酶、底物和輔酶的解離情況,最適宜于它們互相結(jié)合,并發(fā)生催化作用,使酶促反應(yīng)速度達(dá)最大值,這種pH值稱為酶的最適pH(optimum pH)。它和酶的最穩(wěn)定pH不一定相同,和體內(nèi)環(huán)境的pH也未必相同。
動(dòng)物體內(nèi)多數(shù)酶的最適pH值接近中性,但也有例外,如胃蛋白酶的最適pH約1.8,肝精氨酸酶最適pH約為9.8。
最適pH不是酶的特征性常數(shù),它受底物濃度、緩沖液的種類和濃度以及酶的純度等因素的影響。
溶液的pH值高于和低于最適pH時(shí)都會(huì)使酶的活性降低,遠(yuǎn)離最適pH值時(shí)甚至導(dǎo)致酶的變性失活。測定酶的活性時(shí),應(yīng)選用適宜的緩沖液,以保持酶活性的相對恒定。
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2017年臨床助理醫(yī)師考試復(fù)習(xí)資料之pH對反應(yīng)速度的影響的延伸閱讀——影響酶促反應(yīng)速度的因素
(1)酶濃度
在酶促反應(yīng)體系中,若所用的酶制品中不含抑制物,作用物的濃度又足夠大,使酶達(dá)到飽和,則反應(yīng)速度與酶濃度成正比。
(2)作用物濃度
在酶促反應(yīng)中,底物濃度與反應(yīng)速度呈雙曲線型。底物濃度很低時(shí),反應(yīng)速度隨底物濃度增加而上升,而當(dāng)?shù)孜餄舛壤^續(xù)增加,一旦底物濃度達(dá)到相當(dāng)高時(shí),反應(yīng)速度不再上升,達(dá)到極限最大值,稱最大反應(yīng)速度(Vmax)。當(dāng)反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度為Km值,Km值亦稱米氏常數(shù),為酶的特征性常數(shù)。不同的酶Km值不同,同一種酶對不同作用物有不同的Km值。
(3)溫度
酶對溫度的變化極敏感。若自低溫開始,逐漸增高溫度,則酶反應(yīng)速度也隨之增加。但到達(dá)某一溫度后,繼續(xù)增加溫度,酶反應(yīng)速度反而下降。這是因?yàn)闇囟葘γ复俜磻?yīng)有雙重影響。高溫度一方面可加速反應(yīng)的進(jìn)行,另一方面又能加速酶變性而減少有活性酶的數(shù)量,降低催化作用。當(dāng)兩種影響適當(dāng)時(shí),即既不因溫度過高而引起酶損害,也不因過低而延緩反應(yīng)進(jìn)行時(shí),反應(yīng)速度最快,此時(shí)的溫度即為酶的最適溫度。溫血?jiǎng)游锝M織中,酶的最適溫度一般在37~40℃之間。酶的最適溫度與酶反應(yīng)時(shí)間有關(guān)。若酶反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間短暫,則其最適溫度可能比反應(yīng)進(jìn)行時(shí)間較長者高。
(4)酸堿度
酶活性受其所在環(huán)境pH的影響而有顯著差異。其原因是酶的催化作用主要決定于活性中心及一些必需基團(tuán)的解離狀態(tài),有的需呈正離子狀態(tài),有的需呈負(fù)離子狀態(tài),有的則應(yīng)處于不解離狀態(tài),這就需要一定的pH環(huán)境使各必需基團(tuán)處于適當(dāng)?shù)慕怆x狀態(tài),使酶發(fā)揮最大活性。通常只在某一pH時(shí),其活性最大,此pH值稱為酶的最適pH。
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