2013初級藥士考試輔導：兔魏氏梭菌微生物學檢驗

　　采取病兔或死兔的空腸、回腸、盲腸內(nèi)容物、腸黏膜或糞便等作被檢病料。

　　涂片鏡檢：將被檢材料直接涂片，作革蘭氏染色鏡檢，可見有革蘭氏陽性大桿菌，一般很少見到芽孢。

　　分離培養(yǎng)：將病料接種于熟肉培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，或接種于DS培養(yǎng)基，亦可置37℃溫箱培養(yǎng)。5～6小時后培養(yǎng)基變得很混濁，并產(chǎn)生大量氣體。在有氣體出現(xiàn)時(一般在4～6小時)進行傳代(2～3次)可獲純培養(yǎng)物。或者將檢驗材料直接接種于鮮血瓊脂平皿培養(yǎng)基，或葡萄糖鮮血瓊脂平皿培養(yǎng)基，或乳糖牛奶卵黃瓊脂平皿培養(yǎng)基，置于厭氧罐中于37℃溫箱培養(yǎng)24小時。魏氏梭菌在鮮血瓊脂或葡萄糖鮮血瓊脂平皿上，形成圓形、凸起的單個菌落，大小2～4毫米，呈半透明、表面光滑、邊緣整齊;有些菌株，菌落中心凹陷，表面呈放射性條紋狀，邊緣呈鋸齒狀。菌落周圍出現(xiàn)雙溶血圈。在乳糖―牛奶―卵黃瓊脂平皿上，菌落周圍和下面出現(xiàn)乳濁帶。由于發(fā)酵乳糖，菌落周圍呈紅色暈環(huán)，但表面不形成虹彩層。最后根據(jù)典型菌落特征，挑取菌落，接種于鮮血斜面培養(yǎng)基，供以下各種特性檢驗之用。

　　鏡檢：涂片后進行革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陽性、粗大桿菌，很少見有芽孢。

　　生化反應(yīng)：將純培養(yǎng)物接種于糖、醇類等生化反應(yīng)培養(yǎng)基。魏氏梭菌能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖等，靛基質(zhì)陰性，硫化氫陽性。