2022初級(jí)檢驗(yàn)技士高頻考點(diǎn)：雙向擴(kuò)散試驗(yàn)

2022初級(jí)檢驗(yàn)技士高頻考點(diǎn)：雙向擴(kuò)散試驗(yàn)

雙向擴(kuò)散試驗(yàn)是讓抗原和抗體雙方都在瓊脂中各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在比例恰當(dāng)之處形成抗原抗體沉淀線，觀察這種沉淀線的位置、形狀以及對(duì)比關(guān)系，可對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定性分析。根據(jù)試驗(yàn)形式也可分為試管法和平板法兩種。

(一)試管法

(二)平板法

是鑒定抗原抗體的最基本、最常見(jiàn)的方法之一。根據(jù)沉淀線的有無(wú)、形態(tài)和位置可作如下分析：

1.抗原或抗體的存在與否以及相對(duì)含量的估計(jì)　沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致，沉淀線如果靠近抗原孔，則表示抗體含量較大;沉淀線如果靠近抗體孔，則表示抗原含量較大;不出現(xiàn)沉淀線則表明無(wú)對(duì)應(yīng)的抗體或抗原或者抗原過(guò)量。

2.抗原或抗體相對(duì)分子量的分析　抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散，其速度受分子量的影響。分子量小者擴(kuò)散快，反之則較慢。由于慢者擴(kuò)散圈小，局部濃度則較大，形成的沉淀線彎向分子量大的一方;如果兩者分子量大致相等，則形成直線。

3.抗原性質(zhì)的分析　兩種受檢抗原的性質(zhì)可完全相同、部分相同或完全不同。三種情況在雙向擴(kuò)散試驗(yàn)中表現(xiàn)如下：兩條沉淀線互相吻合相連，表明抗體與兩個(gè)抗原中的相同表位結(jié)合而沉淀，兩個(gè)抗原相同;沉淀線呈部分相切，說(shuō)明兩個(gè)抗原之間有部分相同;兩條沉淀線交叉而過(guò)，說(shuō)明兩個(gè)抗原完全不同。

4.抗體效價(jià)的滴定　雙向擴(kuò)散試驗(yàn)是抗血清抗體效價(jià)滴定的常規(guī)方法。固定抗原的濃度，稀釋抗體;或者抗原和抗體雙方皆作不同的稀釋，經(jīng)過(guò)自由擴(kuò)散，形成沉淀線，以出現(xiàn)沉淀線最高的抗體稀釋度為該抗體的效價(jià)。

5.抗原或抗體純度鑒定　用混合抗原或抗體鑒定抗體或抗原，出現(xiàn)一條沉淀線說(shuō)明待測(cè)抗原或抗體純，出現(xiàn)多條沉淀線說(shuō)明不純。

雙向擴(kuò)散試驗(yàn)簡(jiǎn)單易行，用途廣泛，但該技術(shù)靈敏度低，出現(xiàn)結(jié)果慢，不能精確定量，這些弱點(diǎn)在相當(dāng)程度上限制了它的應(yīng)用。

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