2014初級檢驗技士考試:交叉配合試驗方法及意義
傳統(tǒng)的交叉配合(crossmatching)試驗是檢測受者體內(nèi)是否存在抗供者的特異性抗體,現(xiàn)在可同時檢測受者對供者LD抗原的相容程度。不管是否已經(jīng)進(jìn)行過各種HLA分型試驗,交叉配合試驗對選擇移植物都有一定的參考價值。
1.微量細(xì)胞毒試驗:用供者的淋巴細(xì)胞作靶細(xì)胞,與受者的血清進(jìn)行CDC;出現(xiàn)陽性反應(yīng)說明受者體內(nèi)含有抗供者的特異性抗體,移植后很有可能發(fā)生超急排斥反應(yīng)。若要明確受者的抗體是抗Ⅰ類抗原還是抗Ⅱ類抗原,可以將供者的淋巴細(xì)胞進(jìn)一步分離出較純的T細(xì)胞和B細(xì)胞分別進(jìn)行檢測;若要排除患者自身抗體的影響,可以用患者自己的細(xì)胞與自已的血清進(jìn)行試驗作為對照。
交叉配合是移值前必須做的一個檢驗項目;對一些曾經(jīng)接觸過移植抗原的受者,例如多次接受輸血者、經(jīng)產(chǎn)婦、有不成功移植史或接受過血清透析治療者,尤其要進(jìn)行審慎的檢驗。
2.流式細(xì)胞儀檢測:將供者淋巴細(xì)胞與受者血清共育后,用熒光標(biāo)記的抗人Ig對結(jié)合有抗體的細(xì)胞染色,在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行熒光標(biāo)記測定。該法比微量細(xì)胞毒法的靈敏度高100倍,有條件的單位可以優(yōu)先考慮使用。
3.混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng):將供者與受者的淋巴細(xì)胞做雙向混合培養(yǎng),或者滅活供者的淋巴細(xì)胞做向混合培養(yǎng),細(xì)胞反應(yīng)的程度與供-受者相容的程度呈負(fù)相關(guān)。
4.細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞毒試驗:檢測受者對移植物可能發(fā)生的細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞毒作用(cell-mediatedlymphocytotoxicity,CML)。將受者淋巴細(xì)胞與滅活的供者淋巴細(xì)胞做常規(guī)單向MLC,收獲致敏的受者淋巴細(xì)胞后,再與51Cr標(biāo)記的、PHA刺激的供者淋巴細(xì)胞做CML試驗;51Cr釋放的程度與供-受者相容程度呈負(fù)相關(guān)
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