2013初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo):免疫球蛋白片段制備
更新時(shí)間:2013-04-23 10:22:46
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摘要 免疫球蛋白片段制備
五種免疫球蛋白都具抗原性、皆可提取及純化,但如分解成片段(如Fab片段、Fc片段、輕鏈片段等)作為免疫原可制備出分辨力更高的特異性抗血清。制備方法有:
1.溫和條件下離析亞單位。如改變pH;用鹽酸胍或脲等強(qiáng)變性劑將亞單位分開;
2.用還原法或氧化法解離二硫鍵;
3.溴化氰裂解法。用溴化氰裂解蛋白質(zhì)肽鏈;
4.酶裂解法。如木瓜酶可將IgG裂解成2個(gè)Fab片段及1個(gè)Fc片段;胃蛋白酶可將IgG裂解成F(ab‘)2片段及數(shù)個(gè)小片段;胰蛋白酶可將IgG切成不規(guī)則的肽鏈。
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