醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo):多克隆抗體的制備
更新時間:2013-04-09 10:13:54
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摘要 多克隆抗體的制備
大多數(shù)抗原是由大分子蛋白質(zhì)組成,但只是抗原上有限部位的特殊分子結(jié)構(gòu)能與其相應(yīng)抗體結(jié)合,稱此部位為抗原決定簇或表位。
一種天然抗原性物質(zhì)(如細(xì)菌或其分泌的外毒素以及各種組織成分等)往往具有多種不同的抗原決定簇,而每一決定簇都可刺激機(jī)體一種抗體形成細(xì)胞產(chǎn)生一種特異性抗體。
在機(jī)體淋巴組織內(nèi)可存在千百種抗體形成細(xì)胞(即B細(xì)胞),每種抗體形成細(xì)胞只識別其相應(yīng)的抗原決定簇,當(dāng)受抗原刺激后可增殖分化為一種細(xì)胞群,這種由單一細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群體可稱之為細(xì)胞克隆(clone)。同一克隆的細(xì)胞可合成和分泌在理化性質(zhì)、分子結(jié)構(gòu)、遺傳標(biāo)記以及生物學(xué)特性等方面都是完全相同的均一性抗體,亦可稱之為單克隆抗體。
在早期傳統(tǒng)的抗體制備方法是將一種天然抗原經(jīng)各種途徑免疫動物,由于抗原性物質(zhì)具有多種抗原決定簇,故可刺激產(chǎn)生多種抗體形成細(xì)胞克隆,合成和分泌抗各種決定簇抗體分泌到血清或體液中,故在其血清中實(shí)際上是含多種抗體的混合物,稱這種用體內(nèi)免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體,也是第一代抗體。由于這種抗體是不均一的,無論是對抗體分子結(jié)構(gòu)與功能的研究或是臨床應(yīng)用都受到很大限制,因此如何能獲得均一性抗體成為關(guān)注的問題。
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