臨床檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料：血清IgE的檢測(cè)

　　臨床檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料：血清IgE的檢測(cè)

　　IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的抗體，因此檢測(cè)血清總IgE和特異性IgE對(duì)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的診斷和過敏原的確定很有價(jià)值。

　　一、總IgE的測(cè)定

　　(一)測(cè)定方法

　　正常情況下血清IgE僅在ng/ml水平，用常規(guī)測(cè)定IgG或IgM的凝膠擴(kuò)散法檢測(cè)不出IgE，必須用高度敏感的放射免疫測(cè)定法及酶聯(lián)免疫測(cè)定法進(jìn)行檢測(cè)。

　　1.放射免疫吸附劑試驗(yàn)(radioimmunosorbenttest，IRST)是將抗IgE吸附到固相載體上用以檢測(cè)血清IgE的方法，故又稱固相放射免疫測(cè)定(SPRIA);臨床常用雙抗體夾心法，多以濾紙為載體。將抗IgE抗體偶聯(lián)到經(jīng)溴化氟活化的濾紙上，使其與待檢血清及IgE參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行反應(yīng);洗滌后加入125I標(biāo)記的抗人IgE，再經(jīng)洗滌后測(cè)定濾紙片的放射活性，其測(cè)定值與標(biāo)本中的IgE含量呈正相關(guān)。

　　2.酶聯(lián)免疫測(cè)定法測(cè)定血清IgE時(shí)也常用雙抗體夾心ELISA法(詳見第十五章)，操作方便，敏感性也很高，在臨床上經(jīng)常應(yīng)用。

　　3.間接血凝試驗(yàn)用抗IgE至敏紅細(xì)胞，將標(biāo)本血清做系列稀釋后與致敏紅細(xì)胞反應(yīng)。此法更加簡便易行，便于普及，但敏感性比上兩法稍低。

　　(二)臨床意義

　　血清總IgE水平一般用國際單位(IU)或ng表示，1IU=2.4ng，相當(dāng)于WHO標(biāo)準(zhǔn)凍干血清制劑0.00928mg內(nèi)所含的IgE量。正常人群IgE水平受環(huán)境、種族、遺傳、年齡、檢測(cè)方法及取樣標(biāo)準(zhǔn)等因素的影響，以致各家報(bào)道的正常值相差甚遠(yuǎn)。嬰兒臍帶血IgE水平小于0.5IU/ml，出生后隨年齡增長而逐漸升高，12歲時(shí)達(dá)成人水平。成人血清IgE水平約在20～200IU/ml之間，一般認(rèn)為大于333IU/ml(800ng/ml)時(shí)為異常升高。

　　IgE升高相關(guān)的常見疾病有：過敏性哮喘、季節(jié)性過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、藥物性間質(zhì)性肺炎、支氣管肺曲菌病、麻風(fēng)、類天皰瘡及某些寄生蟲感染等。上述疾病時(shí)IgE升高的程度并不一致，在過敏性支氣管肺曲菌病時(shí)最為顯著，其值可達(dá)5000～20000ng/ml，除了此病和特應(yīng)性皮炎以及在花粉季節(jié)之外，任何血清總IgE水平大于5000ng/ml的患者均應(yīng)考慮寄生蟲感染的可能性。

　　二、特異性IgE的測(cè)定

　　(一)測(cè)定方法

　　特異性IgE是指能與某種過敏原特異性結(jié)合的IgE，因此需要用純化的變應(yīng)原代替抗IgE進(jìn)行檢測(cè);常用的方法仍然是放射免疫技術(shù)和酶標(biāo)免疫技術(shù)。

　　1.放射變應(yīng)原吸附劑試驗(yàn)(radioallergosorbenttest，RAST)將純化的變應(yīng)原與固相載體結(jié)合，加入待檢血清及參考對(duì)照，再與同位素標(biāo)記的抗IgE抗體反應(yīng)，然后測(cè)定固相的放射活性，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量，或在標(biāo)本放射活性高于正常人均數(shù)加3S時(shí)判為陽性。

　　2.酶聯(lián)免疫測(cè)定法試驗(yàn)原理及步驟基本同RAST，僅是最后加入酶標(biāo)記的抗IgE，利用酶底物進(jìn)行顯色。測(cè)定結(jié)果的表示也與RAST相同。

　　(二)臨床意義及評(píng)價(jià)

　　RAST是目前公認(rèn)的檢測(cè)型變態(tài)反應(yīng)的有效方法之一，具有特異性強(qiáng)、敏感性高、影響因素少、對(duì)患者絕對(duì)安全等優(yōu)點(diǎn);不但有助于過敏性哮喘的診斷，對(duì)尋找變應(yīng)原也有重要價(jià)值。RAST與皮膚試驗(yàn)和支氣管激發(fā)試驗(yàn)的符合率在80%左右，但不能完全代替后兩種試驗(yàn)，因?yàn)榛铙w試驗(yàn)還能反映嗜堿性粒細(xì)胞和靶細(xì)胞的反應(yīng)性。

　　但是RAST也有許多缺點(diǎn)：費(fèi)用昂貴、花費(fèi)時(shí)間長、放射性同位素易過期而且污染環(huán)境、不同來源試劑盒的參比血清不同而不易相互比較、待檢血清含有相同特異性IgG時(shí)可干擾正常結(jié)果。因此一般只在下列情況下才做RAST：①皮試結(jié)果難以肯定、但需提供進(jìn)一步的診斷證據(jù)者;②不適宜做皮試或激發(fā)試驗(yàn)者，例如老年、幼兒、妊娠婦女、患有皮膚病、對(duì)變應(yīng)原有嚴(yán)重過敏史或正服用抗過敏藥物以及重病者;③觀察脫敏治療效果或研究變態(tài)反應(yīng)機(jī)制。

　　ELISA法與RAST有相似的優(yōu)點(diǎn)，而且還有獨(dú)特的長處，如沒有同位素污染、酶標(biāo)抗體可長期保存，因此在國內(nèi)應(yīng)用較多。用ELISA測(cè)試屋塵和一些花粉的結(jié)果與RAST符合率較高，且與臨床也較符合，但與皮膚試驗(yàn)的符合率可能不夠理想。