2013年檢驗主管技師考試：中性粒細胞功能的檢測

    2013版衛(wèi)生資格“考試寶典”上線 海量題庫 免費升級

      2012年衛(wèi)生資格考試已經結束，新一輪的考試即將到來，環(huán)球網校醫(yī)學考試網整理出2013年檢驗主管技師考試：中性粒細胞功能的檢測。

　　(一)細胞運動功能的檢測

　　小吞噬細胞的運動可以分成隨機運動和定向運動，前者類似于布朗運動。檢測方法是將采集的白細胞懸液滴于玻片上，用光學顯微鏡直接觀察其運動。也可用毛細血管法將細胞懸液裝入硅化毛細血管中，稍加離心，使細胞沉積在一端，切去無細胞的毛細血管段，繼而移放在含細胞培養(yǎng)液的培養(yǎng)小瓶中，37℃溫育 18～20h，游動的細胞將從毛細血管內外移，在管口形成一細胞團，根據(jù)細胞面積可判斷受檢中性粒細胞活動的強弱。某些患者中性粒細胞的任意運動明顯減弱，甚至消失。中性粒細胞的定向運動表現(xiàn)為趨化運動，測定方法有多種，其原理相同，而方法大同小異，常用以下兩法：

　　1.Boyden小室法又稱濾膜小室法，采用特殊的小盒裝置，盒中以一片3～5μm孔徑的微孔濾膜將盒分為上下兩小室。上室加受檢的白細胞懸液;下室加細菌菌體或其產物、酵母菌活化的血清等趨化因子。置37℃溫育數(shù)小時。上室中的中性粒細胞因受下室內趨化因子的招引，使細胞由濾膜微孔進入濾膜內，最后取濾膜，經固定、干燥、著染、脫色等步驟，將透明后的濾膜置油鏡下檢測細胞在膜內通過的距離，求其趨化單位。

　　2.瓊脂糖凝膠平板法將含小牛血清的1%瓊脂糖傾到在玻片或平皿中制成凝膠平板，繼而按圖22-1打孔，每三孔為一組，中央孔加細胞懸液，兩側孔分別加趨化因子或對照培養(yǎng)液，經37℃溫育2～3h后，用2%戊二醛固定，移去瓊脂糖層，經染色后，測量細胞運動的距離，按下式計算移動指數(shù)。

　　移動指數(shù)=趨化移動距離/任意移動距離

　　圖22-1 瓊脂糖平皿法打孔譜型

　　(二)吞噬和殺菌功能的檢測

　　檢測原則是將受檢細胞懸液按一定比例混和，繼加活的白色念珠菌懸液，保溫生，加美藍溶液作活體染色，取樣涂片鏡檢。如胞內白色念珠菌呈藍色，表示該菌已被殺死，共計100200個細胞，分別求其吞噬率和殺菌率。

　　溶細胞法更能直接反映細胞殺菌的情況，將受檢的細胞懸液與一定量已經新鮮人血清調理過的大腸桿菌或金黃色葡萄球菌懸液混合后，置37℃，每隔一定時間取定量培養(yǎng)物，稀釋后接種固體平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)18h后，計算菌落數(shù)，據(jù)以計算中性粒細胞的殺菌能力：

　　正常情況下，對大腸桿菌的殺菌率約為90%，對金黃色葡萄球菌的殺菌率約為85%。

　　在臨床常用的硝基四氮唑藍(NBT)還原試驗，本法用以檢測中性粒細胞的胞內殺菌能力，由于中性粒細胞在殺菌過程中能量消耗劇增，耗氧量亦隨之相應增加，磷酸己糖旁路代謝活力增強，葡萄糖6-磷酸氧化脫氫，此時加入NBT可接受所脫的氫，使原先呈淡黃包的NBT還原成點狀或塊狀甲朊顆粒并沉積在胞漿內。NBT還原反應式如下：

　　近此年來還采用了新穎的化學發(fā)光法，中性粒細胞在吞噬經調理的金黃色葡萄球菌過程中，伴有化學發(fā)光的產生，故可用化學發(fā)光儀測定中性粒細胞的吞噬功能及其代謝活性。實驗證明全血化學發(fā)光試驗可同時獲得兩種信息，即中性粒細胞的吞噬功能、代謝活性及受檢血清的調理功能。由于中性粒細胞的氧代謝活性與對細胞的吞噬率密切相關，殺菌能力與發(fā)光強度相平行，因此化學發(fā)光法可檢測細胞殺菌功能。因此吞噬細胞化學發(fā)光測定法可用以研究中性粒細胞的吞噬功能，代謝活性和血清調理功能，它可在生理溫度和中性環(huán)境下測定，能較好地反映生理條件下吞噬細胞的功能，具有準確靈敏、樣品用量少，簡便快速等優(yōu)點。其敏感性高于NBT還原試驗。

全新套餐（狀元班、榜眼班、探花班）優(yōu)惠進行中

2012檢驗主管技師全真模擬試題及答案匯總

2013年衛(wèi)生專業(yè)技術資格考試報考條件

衛(wèi)生職稱各專業(yè)招生簡章