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2013微生物與寄生蟲(chóng)檢驗(yàn):細(xì)菌感染的分子生物學(xué)檢測(cè)

更新時(shí)間:2012-07-17 11:28:35 來(lái)源:|0 瀏覽0收藏0

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  (一)常用的分子生物學(xué)技術(shù)

  1.核酸雜交 常用的雜交技術(shù)有:斑點(diǎn)雜交、southern印跡、原位雜交、Northern印跡等。探針的種類有全染色體DNA探針、染色體克隆片段DNA探針、質(zhì)粒DNA探針、rRNA基因探針、寡核苷酸探針等。

  2.核酸擴(kuò)增技術(shù) 核酸擴(kuò)增技術(shù)是分子生物學(xué)中最具有重大意義的技術(shù)之一。對(duì)核酸進(jìn)行擴(kuò)增的方法很多,如聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction ,PCR)、連接酶鏈反應(yīng)、自保留序列擴(kuò)增及Q-beta擴(kuò)增等。以聚合酶鏈反應(yīng)最為廣泛應(yīng)用。

  PCR技術(shù)在細(xì)菌的快速檢測(cè)、細(xì)菌的毒素基因檢測(cè)、細(xì)菌的耐藥性檢測(cè)及感染細(xì)菌的流行病學(xué)調(diào)查中得到日益廣泛的應(yīng)用。

  生物芯片是新近發(fā)展的一項(xiàng)對(duì)基因、蛋白質(zhì)、細(xì)胞及其他生物組分進(jìn)行大信息量分析的檢測(cè)技術(shù)。常用的有基因芯片(gene chips)和蛋白芯片(protein chips)。目前正在研制和評(píng)價(jià)中。

  (二)鑒定感染細(xì)菌種屬的方法

  1.細(xì)菌種屬的鑒定

  DNA堿基組成的測(cè)定 G+C mol%含量不同的細(xì)菌,為不同種細(xì)菌;含量相同的可能為不同種的細(xì)菌。細(xì)菌的G+C mol%相當(dāng)穩(wěn)定,不受培養(yǎng)條件、菌齡和其他外界因素影響。最常用的方法是熱變性法。

  DNA-DNA雜交 DNA雜交可得出DNA之間核苷酸順序的互補(bǔ)程度,從而推斷不同細(xì)菌基因組間的同源性。

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