2013年初級檢驗(yàn)技士免疫檢驗(yàn)：生物學(xué)檢測法檢測細(xì)胞因子

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　　生物學(xué)檢測又稱生物活性檢測，是根據(jù)細(xì)胞因子特定的生物活性而設(shè)計(jì)的檢測法。由于各種細(xì)胞因子具有不同的活性，例如IL-2促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，TNF殺傷腫瘤細(xì)胞，CSF刺激造血細(xì)胞集落形成，IFN保護(hù)細(xì)胞免受病毒攻擊，因此選擇某一細(xì)胞因子獨(dú)特的生物活性，即可對其進(jìn)行檢測。

　　生物活性檢測法又可分為以下幾類：

　　1.細(xì)胞增殖法：許多細(xì)胞因子具有細(xì)胞生長因子活性，特別是白細(xì)胞介素，如IL-2刺激T細(xì)胞生長、IL-3刺激肥大細(xì)胞生長、IL-6刺激漿細(xì)胞生長等。利用這一特性，現(xiàn)已篩選出一些對特定細(xì)胞因子起反應(yīng)的細(xì)胞，并建立了只依賴于某種因子的細(xì)胞系，即依賴細(xì)胞株(簡稱依賴株)。這些依賴株在通常情況下不能存活，只有在加入特定因子后才能增殖。例如IL-2依賴株CTLL-2在不含IL-2的培養(yǎng)基中很快死亡，而加入IL-2后則可在體外長期培養(yǎng)。在一定濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞增殖與IL-2量呈正比，因此通過測定細(xì)胞增殖情況(如使用3H-TdR摻入法、MTT法等)鑒定IL-2的含量。除依賴株外，還有一些短期培養(yǎng)的細(xì)胞，如胸腺細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、促有絲分裂原刺激后的淋巴母細(xì)胞等，均可作為靶細(xì)胞來測定某種細(xì)胞因子活性。

　　2.靶細(xì)胞殺傷法：是根據(jù)某些細(xì)胞因子(如TNF)能在體外殺傷靶細(xì)胞而設(shè)計(jì)的檢測方法。通常靶細(xì)胞多選擇體外長期傳代的腫瘤細(xì)胞株，利用同位素釋放法或染料染色等方法判定細(xì)胞的殺傷率。

　　3.細(xì)胞因子誘導(dǎo)的產(chǎn)物分析法：某些細(xì)胞因子可刺激特定細(xì)胞產(chǎn)生生物活性物質(zhì)，如IL-2、IL-3誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞合成胺、IL-6誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通過測定所誘生的相應(yīng)產(chǎn)物，可反映細(xì)胞因子的活性。

　　4.細(xì)胞病變抑制法：病毒可造成靶細(xì)胞的損傷，干擾素等則可抑制病毒所導(dǎo)致的細(xì)胞病變，因此可利用細(xì)胞病變抑制法檢測這類因子。

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