2013初級(jí)檢驗(yàn)技師生化檢驗(yàn)輔導(dǎo):淀粉酶測(cè)定(AMY)
淀粉酶包括唾液淀粉酶和胰淀粉酶,Cl-是該酶的激活劑 。
(一)方法
(1)碘一淀粉比色法測(cè)定:B血清(或血漿)中a一淀粉酶(a-AMY)催化淀粉分子中α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖及含有α-1,6糖苷支鏈的糊精。在底物過(guò)量的條件下,反應(yīng)后加入碘液與未被水解的淀粉結(jié)合成藍(lán)色復(fù)合物,其藍(lán)色的深淺與空白管比較、從而推算出淀粉酶的活性單位。
(2)對(duì)一硝基苯麥芽七糖苷法:以對(duì)-硝基苯麥芽七糖苷為底物,經(jīng)α-淀粉酶催化,水解為游離的寡糖(G5、G4、G3)及葡萄糖單位減少的對(duì)一硝基苯寡糖苷(4NP―G2、4NP-G3、4NP-G2);4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4,受α-葡萄糖苷酶催化,水解為對(duì)一硝基酚和葡萄糖。對(duì)一硝基酚的生成量,在一定范圍內(nèi)與R-淀粉酶活力成正比;但其摩爾數(shù)僅為酶解底物(4NP-G7)的三分之一,還有三分之二結(jié)合在4NP-G4中。
PNP(對(duì)一硝基苯酚)的生成引起405nm處吸光度的上升,上升速率與AMY的活力成正比。
(3)2-氯一4一硝基苯麥芽三糖苷法
CNP(2一氯一4一硝基苯酚)的生成引起405nm處吸光度的上升,上升速率與AMY的活力成正比。
(二)生理變異
成年人血中AMY與性別、年齡、進(jìn)食關(guān)系不大,新生兒AMY缺乏。滿(mǎn)月后才出現(xiàn)此酶,逐步升高,約在5歲時(shí)達(dá)到成人水平,老年人AMY開(kāi)始下降,約低25%。
(三)參考值
碘一淀粉比色法:血清80~l80U/L;尿液100~1200U/L
對(duì)一硝基苯麥芽七糖苷法:血清淀粉酶220 U/L(37℃)
尿淀粉酶1200U/L(37℃)
(四)臨床意義
淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)。
1.升高:
(1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY顯著增高。發(fā)病后8~12h血清AMY開(kāi)始增高,12~24h達(dá)高峰,2~5天下降至正常。尿AMY約于發(fā)病后12~24h開(kāi)始升高,下降比血清AMS慢,因此,在急性胰腺炎后期測(cè)定尿AMY更有價(jià)值。特別是急性胰腺炎時(shí)。
碘一淀粉比色法結(jié)果如超過(guò)500U有意義,達(dá)350U時(shí)應(yīng)懷疑此病。
(2)流行性腮腺炎
(3)急性闌尾炎、腸梗阻、胰腺癌、膽石癥、潰瘍病穿孔及嗎啡注射后等均可見(jiàn)血清AMY增高,但常低于500U。
2.降低:
正常人血清中AMY主要由肝臟產(chǎn)生,故血清與尿中AMY同時(shí)減低主要見(jiàn)于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性膽囊炎等。
腎功能障礙時(shí),血清AMY也可降低。
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