2012初級(jí)檢驗(yàn)技師基礎(chǔ)知識(shí)：腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)

　　1.檢測(cè)原理

　　(1)清亮或微渾的腦脊液標(biāo)本，可以直接計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)，或稀釋后再直接計(jì)數(shù)，將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

　　(2)可采用直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)白細(xì)胞，或稀釋后再直接計(jì)數(shù)，將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

　　(3)白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后，在高倍鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。也可采用Wright染色后，油鏡下分類計(jì)數(shù)。

　　2.方法學(xué)評(píng)價(jià)

　　細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)常用顯微鏡計(jì)數(shù)法。白細(xì)胞直接分類法簡(jiǎn)單、快速，但準(zhǔn)確性差，尤其是陳舊性標(biāo)本，細(xì)胞變形，分類困難，誤差較大。涂片染色分類法細(xì)胞分類詳細(xì)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，尤其是可以發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞如腫瘤細(xì)胞，故推薦使用此法。該法不足之處是操作較復(fù)雜，費(fèi)時(shí)。

　　腦脊液細(xì)胞收集有幾種方法，離心涂片法常影響細(xì)胞形態(tài)及分類。目前，玻片離心沉淀法和細(xì)胞室沉淀法已用于腦脊液細(xì)胞的濃縮和收集，其優(yōu)點(diǎn)是收集的細(xì)胞形態(tài)完整(尤其是細(xì)胞室沉淀法)，分類效果好。另外，玻片離心沉淀法陽(yáng)性率高。

　　血細(xì)胞分析儀進(jìn)行腦脊液計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類，此法簡(jiǎn)單、快速，可以自動(dòng)化。但病理性、陳舊性標(biāo)本中的組織、細(xì)胞的碎片和殘骸以及細(xì)胞變形等都可以影響細(xì)胞分類和計(jì)數(shù)，故重復(fù)性、可靠性有待進(jìn)一步探討。另外，蛋白質(zhì)含量高，尤其有凝塊的腦脊液標(biāo)本容易使儀器發(fā)生堵孔現(xiàn)象，故不推薦使用。

　　3.質(zhì)量控制

　　(1)細(xì)胞計(jì)數(shù)：①標(biāo)本采集后應(yīng)在1h內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。標(biāo)本放置過(guò)久，細(xì)胞可能凝集成團(tuán)或被破壞，影響計(jì)數(shù)結(jié)果。②標(biāo)本必須混勻后方可進(jìn)行檢查，否則會(huì)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。

　　(2)校正與鑒別：①因穿刺損傷血管，引起血性腦脊液，白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果必須校正，以消除因出血帶來(lái)的白細(xì)胞。②細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)注意紅細(xì)胞、白細(xì)胞與新生隱球菌的鑒別。新生隱球菌不溶于乙酸，加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見(jiàn)未染色的莢膜;白細(xì)胞也不溶于乙酸，加酸后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)更加明顯;紅細(xì)胞加酸后溶解。

　　(3)檢查方法：白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法的試管與吸管中的冰乙酸要盡量去盡，否則可使結(jié)果偏低。若標(biāo)本陳舊、細(xì)胞變形時(shí)，白細(xì)胞直接分類法誤差大，可采用涂片染色分類法分類計(jì)數(shù)。

　　(4)染色固定：涂片染色分類計(jì)數(shù)時(shí)，離心速度不能太快，否則會(huì)影響細(xì)胞形態(tài)，可采用玻片離心法、沉淀室法收集細(xì)胞。涂片固定時(shí)間不能太長(zhǎng)，更不能高溫固定，以免使細(xì)胞皺縮，影響檢驗(yàn)結(jié)果。

　　4.參考值

　　(1)無(wú)紅細(xì)胞。

　　(2)白細(xì)胞極少，成人：(0～8)×106/L，兒童：(1～15)×106/L，主要為單個(gè)核細(xì)胞，淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞之比為7:3.

2012年衛(wèi)生資格考試大綱匯總