2013年初級(jí)檢驗(yàn)技士免疫檢驗(yàn):白細(xì)胞的分離
更新時(shí)間:2012-10-12 17:18:57
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(一)血液中紅細(xì)胞與白細(xì)胞比例約600~1000:1,兩者的比重不同其沉降速度亦異,通常用兩種方法加以分離。
本法是利用血細(xì)胞自然沉降率的分離法,采集血液后應(yīng)及時(shí)抗凝,通常選用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,從而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白而防止血液凝固。操作原則是將含抗凝血的試管直立靜置室溫30~60min后,血液分成明顯三層,上層為淡黃色血漿,底層為紅細(xì)胞,緊貼紅細(xì)胞層上面的灰白層為白細(xì)胞,輕輕吸取即得富含白細(xì)胞的細(xì)胞群,離心洗滌后加入少量蒸餾水或含氯化銨的Gey溶液,經(jīng)短時(shí)間的低滲處理,使紅細(xì)胞裂解,經(jīng)過反復(fù)洗滌可得純度較高的白細(xì)胞懸液。
(二)聚合物加速沉淀法
本法是利用高分子量的聚合物如明膠、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮(polyvinylpyrolidone,PVP)等使紅細(xì)胞凝集成串,加速紅細(xì)胞沉降,使之與白細(xì)胞分離。本法的細(xì)胞獲得率比自然沉降法高。
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