2013年初級檢驗技士免疫檢驗：免疫金銀染色

    點擊進入：2013年檢驗技士|檢驗技師考試報名時間

　　免疫金銀染色(immunogoldsilverstaining，IGSS)是在金免疫技術基礎上發(fā)展起來的更為敏感的技術，由Holgate在1983年首先建立成功。

　　一、原理

　　金免疫技術測定的產(chǎn)物上的金顆粒可將銀離子還原成銀顆粒，在金顆粒表面形成一色澤更深的黑色層，因而增強了金免疫技術的敏感性。

　　二、方法

　　IGSS的主要試劑為銀染液。以往一般用硝酸銀染液，但其對光的穩(wěn)定性較差;改用乙酸銀溶液后穩(wěn)定性加強，配方如下：

　　A液：0.22%乙酸銀溶液(乙酸銀110mg溶于去離子水50ml中)。

　　B液：50%阿拉伯樹膠溶液(阿拉伯樹膠50g溶于去離子水100ml中，每天振搖3次，5天后過濾使用)。

　　C液：1%對苯二酚溶液(對苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的檸檬酸鹽緩沖液50ml中)。

　　D液：在C液中加入B液10～40ml。

　　使用前將A液和D液等量混合，即為銀染液。

　　IGSS多用于組織化學檢測。對于以膜為載體的免疫學試驗，金染色后的銀加強可按下法進行：將膜用0.05mol/LpH8.2TBS浸洗3 次，每次3min，用去離子水沖洗一次，浸入0.05mol/LpH3.8檸檬酸緩沖液平衡5min，浸入銀染液中，37℃25min。將膜取出，用去離子水沖洗，放入定影液1min，去離子水沖洗，空氣干燥。

　　三、應用

　　金免疫技術的敏感度低于其它標記免疫技術，經(jīng)銀加強染色后敏感度可與熒光免疫技術和酶免疫技術相當。因此近年來發(fā)展了不少IGSS方法以替代熒光免疫技術，可以在普通顯微鏡下進行檢測。

　　在以膜為載體的免疫技術(如免疫印跡法)中，也有應用IGSS以替代酶免疫法。也有用金標記抗體代替酶標記抗體進行類似ELISA的測定，最后進行銀加強，其敏感度與ELISA相仿。

2013年檢驗資格考試報考指南：報考條件

2012年檢驗技士/技師考試報考指南：考試用書

衛(wèi)生資格檢驗職稱考試歷年試題及答案解析

全新套餐（狀元班、榜眼班、探花班）贈“最新版教材”

衛(wèi)生職稱各專業(yè)招生簡章

查看更多：檢驗技士|技師|主管技師考試  檢驗技士在線?？?/FONT> 檢驗免費試聽