初級(jí)檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)資料：肺炎支原體

　　初級(jí)檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)資料：肺炎支原體$lesson$

　　肺炎支原體

　　(一)生物學(xué)特性

　　菌體呈短細(xì)絲狀，典型的形態(tài)類似酒瓶狀，沒有細(xì)胞壁，僅有細(xì)胞膜。Giemsa染色呈淡紫色。分離培養(yǎng)的最適pH為7.6-8.0。P1蛋白是肺炎支原體主要特異性免疫原，是目前血清學(xué)診斷的主要抗原。

　　(二)致病性

　　肺炎支原體可從口腔、呼吸道分離到，主要通過飛沫傳染，是人類原發(fā)性非典型性肺炎的主要病原體之一。兒童和青少年易感，首先引起上呼吸道感染，然后下行感染。病理性變化主要是間質(zhì)性肺炎、急性細(xì)支氣管炎。還可引起肺外并發(fā)癥。

　　(三)微生物學(xué)檢驗(yàn)

　　采集咽分泌物、痰、支氣管分泌物、胸水等。

　　1、分離與鑒定

　　這是確診支原體感染的可靠方法之一。常以牛心消化液為基礎(chǔ)另加20%小牛血清及新鮮酵母浸液制成液體或固體培養(yǎng)基。初次分離生長(zhǎng)緩慢，通常先將標(biāo)本接種于液體培養(yǎng)基中增菌，1周后培養(yǎng)基指示劑顏色改變，液體清晰，可轉(zhuǎn)種于固體平板培養(yǎng)基，在5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)，初次分離肺炎支原體需1-2周才長(zhǎng)菌落。菌落常不出現(xiàn)“荷包蛋”樣，需經(jīng)數(shù)次傳代后，菌落開始典型。肺炎支原體分離培養(yǎng)有時(shí)需20天或更長(zhǎng)時(shí)間，對(duì)臨床快速診斷意義不大。

　　支原體在固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出典型菌落，依此可初步診斷，再進(jìn)一步進(jìn)行生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定。生化反應(yīng)如：

　　(1)葡萄糖、精氨酸、尿素分解試驗(yàn)：發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，不能利用精氨酸、尿酸。

　　(2)氯化三苯基四氮唑(TTC)還原試驗(yàn)：使無色TTC還原為粉紅色。

　　(3)生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)(GIT)和代謝抑制試驗(yàn)(MIT)。

　　(4)紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)：肺炎支原體的菌落能發(fā)生紅細(xì)胞吸附。

　　2、血清學(xué)試驗(yàn)

　　(1)特異性血清學(xué)試驗(yàn)

　　1)ELISA技術(shù)：敏感性和特異性高，快速、經(jīng)濟(jì)，并可檢測(cè)IgM和IgG抗體，為目前診斷的可靠方法。利用ELISA捕獲法，以抗P1蛋白單抗檢測(cè)標(biāo)本中的肺炎支原體P1蛋白，特異性高，敏感性高。

　　2)補(bǔ)體結(jié)合(CF)試驗(yàn)

　　診斷肺炎支原體常用的血清學(xué)方法，一般血清學(xué)滴度≥1：64~1：128即為陽性，病程中雙份血清至少效價(jià)有4倍增長(zhǎng)，近期感染可能性越大。主要檢測(cè)IgM抗體。初次感染時(shí)出現(xiàn)陽性，再次感染時(shí)常不出現(xiàn)陽性。

　　3)間接血細(xì)胞凝集試驗(yàn)

　　敏感度略高于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，主要檢測(cè)IgM抗體。

　　(2)非特異性血清學(xué)試驗(yàn)

　　冷凝集試驗(yàn)：將患者血清與O型Rh陰性紅細(xì)胞在4℃下作凝集試驗(yàn)。一般血清學(xué)滴度≥1：64為陽性，病程中雙份血清至少效價(jià)有4倍增長(zhǎng)，近期感染可能性越大。

　　3、PCR試驗(yàn)快速檢測(cè)：敏感和特異性高，以特異性引物通過該技術(shù)從患者痰中檢測(cè)肺炎支原體DNA。

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