初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：熒光免疫自動(dòng)化分析

　　初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：熒光免疫自動(dòng)化分析 $lesson$

　　熒光免疫自動(dòng)化分析

　　(1)時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定(TRFIA)：是一種非同位素免疫分析技術(shù)，它用鑭系元素標(biāo)記抗原或抗體，根據(jù)鑭系元素螯合物的發(fā)光特點(diǎn)，用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光，同時(shí)檢測(cè)波長(zhǎng)和時(shí)間兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行信號(hào)分辨，可有效地排除非特異熒光的干擾，極大地提高了分析靈敏度。

　　①分析原理：它主要使用長(zhǎng)效熒光標(biāo)記物(稀土金屬Eu、Tb、Sm、Dy)，在關(guān)閉激發(fā)光后再測(cè)定熒光強(qiáng)度的分析方法。

　�、跁r(shí)間分辨信號(hào)原理：普通物質(zhì)熒光光譜分為激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，在選擇熒光物質(zhì)作為標(biāo)記物時(shí)，必須考慮激發(fā)光譜和發(fā)射光譜之間的波長(zhǎng)差，以防影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　�、劢怆x增強(qiáng)原理：它用具有雙功能基團(tuán)結(jié)構(gòu)的螯合劑，使其一端與銪(Eu)連接，另一端與抗體/抗原分子上的自由氨基連接，形成EU標(biāo)記的抗體/抗原，經(jīng)過(guò)免疫反應(yīng)之后生成免疫復(fù)合物。由于這種復(fù)合物在水中的熒光強(qiáng)度非常弱，因此加入一種增強(qiáng)劑，來(lái)大大增強(qiáng)熒光信號(hào)。

　　(2)熒光偏振免疫測(cè)定(FPIA)：熒光素標(biāo)記的抗原與標(biāo)本中的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體，反應(yīng)后用單一平面偏振的光源照射，熒光素被激發(fā)產(chǎn)生偏振熒光。偏振熒光強(qiáng)度與分子轉(zhuǎn)動(dòng)的速度成反比。主要用于測(cè)定小分子藥物濃度。

　　(3)熒光酶免疫分析：是以堿性磷酸酶為標(biāo)記用酶，以反應(yīng)管作為固相載體，以4-甲基傘型酮磷酸鹽(4-MUP)為酶反應(yīng)熒光基質(zhì)。根據(jù)熒光計(jì)數(shù)儀記錄熒光強(qiáng)度來(lái)計(jì)算所測(cè)物質(zhì)的濃度�？捎糜诟鞣N抗原抗體的檢測(cè)。

　　(4)臨床應(yīng)用：可應(yīng)用于多種物質(zhì)的檢測(cè)：例如腫瘤標(biāo)志物;激素;甲狀腺激素;鐵蛋白;HbsAg等。FPIA主要用于藥物濃度的檢測(cè)及分析：如葉酸、VB12、可卡因、利多卡因等。熒光酶免疫分析主要用于過(guò)敏原檢測(cè)以及特異性IgE檢測(cè)。

　　例題：時(shí)間分辨熒光免疫分析所用的標(biāo)記物是：

　　A.FITC B.PE C.PEcy7 D.鑭系元素

　　答案：D

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