初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):埃希菌屬微生物學(xué)檢查
初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):埃希菌屬微生物學(xué)檢查 $lesson$
微生物學(xué)檢查
1、標(biāo)本采集:
腸道感染可采集糞便;腸外感染可根據(jù)臨床感染情況采集標(biāo)本,除血液標(biāo)本外,均需作涂片染色檢查。膿、痰、分泌物可直接涂片,革蘭染色后鏡檢。尿液和其它液體先低速離心,再取沉淀物作涂片。
2、檢驗(yàn)方法及鑒定
(1)涂片與鏡檢:膿汁及增菌培養(yǎng)物發(fā)現(xiàn)單一革蘭陰性桿菌,可初步報(bào)告,染色、形態(tài)、性狀供臨床用藥參考。
(2)分離培養(yǎng):糞便標(biāo)本可用弱選擇鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行分離,膿汁等可用血平板分離,取可疑菌落進(jìn)行形態(tài)觀察及生化反應(yīng)。
(3)鑒定:
1)初步鑒定:根據(jù)菌落特征,涂片染色的菌形及染色反應(yīng),取純培養(yǎng)物作生化反應(yīng)。
凡符合KIA(克氏雙糖):A/A或K/A(A是產(chǎn)酸,K是產(chǎn)堿),產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣,H2S(陰性),尿素(MIU):動(dòng)力+或-、吲哚+、脲酶-,甲基紅+,硝酸鹽還原+,VP-,氧化酶-,枸櫞酸鹽-,可鑒定為大腸埃細(xì)菌。
2)最后鑒定:一般常規(guī)檢驗(yàn)做到上述初步鑒定即可,必要時(shí)可做系列生化反應(yīng)最后鑒定。其中主要的鑒定試驗(yàn)為:氧化酶陰性、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸、發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或遲緩發(fā)酵產(chǎn)酸、不發(fā)酵肌醇、IMViC反應(yīng)為++--、脲酶陰性、H2S陰性、苯丙氨酸脫氫酶陰性、硝酸鹽還原陽(yáng)性、動(dòng)力多數(shù)陽(yáng)性。
3)某些大腸埃細(xì)菌,尤其是無(wú)動(dòng)力的不發(fā)酵乳糖株,應(yīng)與志賀菌相鑒別,兩者的主要鑒別試驗(yàn)可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗(yàn)及粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸三種試驗(yàn)。大腸埃希菌均為陽(yáng)性,而志賀菌均為陰性。
腸道外感染,經(jīng)涂片染色,分離培養(yǎng)后,生化鑒定到種;由于大腸埃希菌是超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的主要產(chǎn)酶株,該酶由質(zhì)粒介導(dǎo)。應(yīng)對(duì)β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)菌株進(jìn)行確定,根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用有活性的抗生素進(jìn)行治療。
4)血清學(xué)鑒定:
ETEC(腸毒素型大腸桿菌)血清學(xué)鑒定
EPEC(腸致病型大腸桿菌)血清學(xué)鑒定
EIEC(腸侵襲型大腸桿菌)血清學(xué)鑒定
EHEC(腸出血型大腸桿菌)血清學(xué)鑒定
EAEC(腸凝聚型大腸桿菌)血清學(xué)鑒定
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