初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo):酶免疫測(cè)定的應(yīng)用

　　初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo):酶免疫測(cè)定的應(yīng)用

　　酶免疫測(cè)定具有高度的敏感性和特異性，幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測(cè)。它的最小可測(cè)值達(dá)ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比，酶免疫測(cè)定的優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記試劑比較穩(wěn)定，且無(wú)放射性危害。因此，酶免疫測(cè)定的應(yīng)用日新月異，酶免疫測(cè)定的新方法、新技術(shù)不斷發(fā)展。但酶免疫測(cè)定在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的普及應(yīng)歸功于商品試劑盒和自動(dòng)或半自動(dòng)檢測(cè)儀器的問(wèn)世。酶免疫測(cè)定步驟復(fù)雜，試劑制備困難。只有用符合要求的試劑和標(biāo)準(zhǔn)化的操作，才能獲得滿意的結(jié)果。

　　商品ELISA試劑盒中應(yīng)包含包被好的固相載體、酶結(jié)合物底物和洗滌液等。先進(jìn)的試劑盒不僅提供全部試劑成分，而且所有試劑均已配制成應(yīng)用液，并在各種試劑中加色素，使之呈現(xiàn)不同的顏色。ELISA操作步驟多，所需試劑也多，這種有色試劑既方便操作又有利于減少操作錯(cuò)誤。ELISA所有儀器除定量測(cè)定中必需的出色儀(專用的稱為ELISA測(cè)讀儀)外，洗滌板也極有用。洗滌機(jī)的使用不僅省時(shí)省工，而且也利于操作標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)中小型實(shí)驗(yàn)室是實(shí)用且易于接受的。但應(yīng)注意在采用洗板機(jī)前，應(yīng)先對(duì)洗板機(jī)的性能加以檢定，確認(rèn)各孔的洗滌效果是否徹底，且重復(fù)性好。

　　半自動(dòng)和自動(dòng)化ELISA分析儀亦趨成熟，并在大中型臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中取得應(yīng)用。自動(dòng)化ELISA分析儀有開放系統(tǒng)(open system)和封閉系統(tǒng)(close system)兩類。前者適用于所有的96孔板的ELISA測(cè)定;后者只與特定試劑配套使用。

　　免疫滲濾試驗(yàn)和免疫層析試驗(yàn)具有簡(jiǎn)便、快速、單份測(cè)定、可立等結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，無(wú)需任何儀器設(shè)備，試劑穩(wěn)定，因此多用于急診檢驗(yàn)。這類試驗(yàn)不能準(zhǔn)確定量，所以主要限于檢測(cè)正常體液中不存在的物質(zhì)(如診斷傳染病的抗原或抗體)以及正常含量極低而在特殊情況下異常升高的物質(zhì)(如hCG等)。目前臨床檢驗(yàn)中已開展的項(xiàng)目有hCG、抗HCV和抗HIV、HBsAg等，新項(xiàng)目正在不斷發(fā)展中。

　　均相酶免疫測(cè)定主要用于藥物和小分子物質(zhì)的檢測(cè)。ELISA則應(yīng)用更為廣泛，可用以檢測(cè)的項(xiàng)目包括以下幾個(gè)方面：

　　1.病原體及其抗體廣泛應(yīng)用于傳染病的診斷.。病毒肝炎病毒、風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等;細(xì)菌如鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、幽門螺桿菌和布氏桿菌等;寄生蟲如弓形體、阿米巴、瘧原蟲等。

　　2.蛋白質(zhì)各種免疫球蛋白、補(bǔ)體組分、腫瘤標(biāo)志物(如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原等)、各種血漿蛋白質(zhì)、同工酶(如肌酸激酶CK-MB)、激素(如hCG、FSH、TSH)。

　　3.非肽類激素如T3、T4、雌激素、皮質(zhì)醇等。

　　4.藥物和毒品如地高辛、苯巴比妥、慶大霉素、嗎啡等。

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