初級檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)
更新時(shí)間:2010-12-10 11:27:06
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初級檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)
免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)
(1)原理:是利用電鏡下可見的示蹤標(biāo)記物標(biāo)記特異性抗體(或抗原),使之與組織超薄切片中的相應(yīng)抗原(或抗體)反應(yīng),形成不溶性免疫復(fù)合物,用電鏡觀察可見的標(biāo)記物,間接證實(shí)免疫反應(yīng)的發(fā)生。
(2)常用的免疫標(biāo)記電鏡技術(shù)
①鐵蛋白標(biāo)記免疫電鏡技術(shù):抗體與鐵蛋白通過低分子量的雙功能試劑結(jié)合為一種雙分子復(fù)合物。
②酶標(biāo)記免疫電鏡技術(shù):是以酶作為抗原抗體反應(yīng)的標(biāo)記物,與相應(yīng)的酶底物作用,形成一種不溶性的反應(yīng)產(chǎn)物。包括酶標(biāo)記抗體法、非標(biāo)記抗體酶法和非標(biāo)記的過氧化物酶-抗過氧化物酶技術(shù)(即PAP法)。
③膠體金標(biāo)記免疫電鏡技術(shù):是利用膠體金在堿性環(huán)境中帶有負(fù)電的性質(zhì),使其與抗體相吸附,從而將抗體標(biāo)記。當(dāng)用金標(biāo)記的抗體與抗原反應(yīng)時(shí),在光鏡水平膠金液呈現(xiàn)鮮艷的櫻紅色,不需外加染色。
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